从 Panel 设计、样本制备和表面或胞内染色，到补偿、采集、门控和统计分析的多参数流式解决方案。
实验目的
在单细胞水平分析细胞表型、蛋白表达、活性、凋亡、细胞周期及稀有亚群，并支持多参数分群。
适用范围与实验要求
- 样本：培养细胞、血液或骨髓、组织消化单细胞悬液
- 要求：明确仪器激光和滤光片配置、目标抗原丰度、颜色数量及预计目标群频率
- 耗时：通常 4–8 小时；复杂 Panel 需额外滴定和优化
- 安全：新鲜人源或动物源样本按相应生物安全等级操作
标准工作流程
- 根据仪器配置和抗原丰度设计 Panel
- 制备高活率、低聚团的单细胞悬液
- 进行 Fc 受体封闭、活死染和表面染色
- 按需固定通透并完成胞内染色
- 准备未染、单染补偿和 FMO 对照
- 执行仪器日常 QC 和补偿或光谱拆分
- 采集满足低频群分析需要的事件数
- 依据预注册门控策略完成统计
设备、试剂与耗材
- 设备：流式分析仪或分选仪、生物安全柜、离心机、计数设备和分析软件
- 试剂：流式抗体 Panel、活死染料、Fc 阻断剂、染色缓冲液、固定通透试剂和补偿材料
- 耗材：流式管或过滤孔板、细胞滤网、低吸附离心管和枪头
必需对照与 QC
- 未染、单染补偿、FMO、活死染、生物学阳性和阴性对照
- 仪器 QC 通过；单细胞和活细胞门清晰；补偿无明显欠补或过补
- FMO 支持阳性阈值；低频群报告实际事件数；门控模板和批次可追溯
常见问题
样本聚团时优化消化并过滤；背景高时滴定抗体并加强 Fc 封闭；补偿异常时检查单染对照亮度；信号漂移时清洗流路并重新质控。
产品选型入口
科研用途说明：本流程用于科研分析，不作为临床诊断依据。