在有限体积的血清、血浆、培养上清或其他样本中同步定量多种细胞因子、趋化因子或免疫标志物，并形成可比较的免疫谱。
实验目的
在有限体积的血清、血浆、培养上清或其他样本中同步定量多种细胞因子、趋化因子或免疫标志物，并形成可比较的免疫谱。
适用范围与实验要求
- 样本：血清与血浆
- 样本：细胞培养上清
- 样本：组织或细胞裂解液
- 样本：经验证的其他体液样本
- 物种：人、小鼠、大鼠、其他需核对试剂盒反应性的物种
- 难度与耗时：中高级，约 1–2 天
- 安全：人体和动物来源样本按风险等级处理；统一冻融次数并避免微球暴露于强光；临床用途需使用适用的验证体系和法规流程。
实验原理
不同编码微球分别偶联捕获抗体，与样本靶标及检测抗体形成夹心复合物；仪器通过微球编码识别分析物，并以荧光信号和标准曲线计算浓度。
标准工作流程
- 确定分析物面板、样本类型和预期浓度范围
- 统一样本采集、处理、保存和冻融记录
- 通过预实验确定稀释倍数与基质效应
- 准备微球、标准品、质控和样本布局
- 按固定时序完成捕获、检测和报告孵育
- 充分洗涤并保持微球重悬和避光
- 采集足够微球事件并检查仪器性能
- 拟合标准曲线、执行批次 QC 并报告可定量结果
设备、试剂与耗材
- 设备：多重微球检测平台或兼容流式细胞仪、微孔板振荡与洗板设备、多道移液器或自动化液体处理系统、数据拟合与质量控制软件
- 试剂：多重捕获微球和检测抗体、标准品与质控品、样本稀释、孵育和洗涤缓冲液、报告荧光试剂
- 耗材：平台兼容微孔板、滤芯枪头与试剂槽、低吸附样本管、封板膜和避光材料
必需对照与 QC
- 试剂空白
- 完整标准曲线
- 低、中、高浓度质控
- 基质匹配对照
- 桥接样本和技术重复
- 标准曲线覆盖样本范围且拟合合格；质控结果位于接受区间；微球回收和事件数充足；空白背景低；重复变异受控；超范围样本按规则重测或稀释。
关键参数与结果解释
面板兼容性、样本基质、稀释倍数、标准曲线模型、微球回收、每分析物事件数、孵育时间、洗涤一致性和批次效应决定数据质量。
多重检测结果应区分低于定量下限、可定量和超出上限三种状态，并结合样本稀释、基质效应、多重比较和临床或生物学背景解释。关键标志物宜用单项方法或独立队列验证。
常见问题与排错
微球回收低时检查重悬、洗涤和仪器流路；背景高时核对封闭和洗涤；标准曲线异常时检查复溶、稀释和读板时序；样本普遍超范围时增加稀释；板间偏差时使用桥接样本和统一批次。
产品 BOM 入口
科研用途说明：本流程仅用于科研实验设计和产品选型；具体参数、兼容性、规格、价格和交付以项目评估及正式报价为准。